Opryszczka

Diagnoza opryszczki, która przechodzi testy?

Infekcje opryszczki narządów płciowych (HSV, HSV) są szeroko rozpowszechnione na całym świecie, a badania epidemiologiczne wykazują wzrost wskaźnika infekcji na całym świecie. Opryszczka narządów płciowych jest jedną z przyczyn wrzodziejących zmian w narządach płciowych. Infekcja wirusem opryszczki jest wywołana przez typy HSV 1 lub HSV-2 Większość przypadków opryszczki narządów płciowych jest związana z HSV-2, ale bierze się również pod uwagę zakażenie i HSV-1. Obraz kliniczny pierwszego epizodu opryszczki narządów płciowych u pacjentów z zakażeniem HSV-1 i HSV-2 jest podobny, częstotliwość a stopień nawrotu jest mniejszy w przypadku HSV-1 niż w przypadku HSV-2. Ponadto nasilenie pierwszego epizodu i reaktywacja z zakażeniem HSV-2 jest mniejsza u pacjentów z wcześniejszym HSV-1. Należy zauważyć, że większość zakażeń wirusem opryszczki jest bezobjawowa lub nierozpoznana. Infekcja opryszczkowa może wydawać się nietypowa, co utrudnia postawienie diagnozy. Większość przypadków przeniesienia wirusa na partnera lub z matki na noworodka występuje w przypadku braku objawów klinicznych. Przeprowadzono badania, które wykazały, że HSV zwiększa ryzyko zakażenia wirusem HIV. Leki przeciwwirusowe zmniejszają objawy kliniczne HSV, co znacznie zmniejsza ryzyko przeniesienia.

Jest ważny

Diagnozowanie opryszczki jest ważne dla określenia taktyki zarządzania, ale testy opryszczki nie są uwzględnione w badaniach przesiewowych..

Istnieje wiele sposobów wykrywania HSV, a diagnoza kliniczna opryszczki narządów płciowych powinna zawsze być poparta badaniami laboratoryjnymi, w tym serotypowaniem, ponieważ serotyp wpływa zarówno na rokowanie, jak i schemat leczenia.. Ostateczną diagnozę opryszczki narządów płciowych ustala się na podstawie wizualizacji określonych objawów w okolicy narządów płciowych, z uwolnieniem wirusa lub z wykryciem antygenu. W niektórych laboratoriach wykrywanie DNA HSV za pomocą metod diagnostyki molekularnej zastępuje izolację hodowli wirusowej i diagnostykę ELISA. Testy serologiczne są przeprowadzane u pacjentów z objawami infekcji opryszczki, gdy metody bezpośrednie wykazują negatywne wyniki, przy braku objawów i w celu ustalenia przeszłej lub obecnej infekcji.. 

Następujące aspekty wpływają na wyniki diagnostyki laboratoryjnej HSV:

  • rodzaj testu;
  • jakość próbki,
  • możliwości laboratoryjne;
  • interpretacja wyników.

Metody bezpośrednie

Próbki uzyskane ze zmian pęcherzykowych w ciągu pierwszych 72 godzin ich pojawienia się mają dużą wartość diagnostyczną. Inne biomateriały z wcześniejszej zmiany lub badania rozmazu narządów płciowych są wykonywane, jeśli istnieje wysokie ryzyko HSV. Jeśli na tle gojenia pojawiają się skórki, prawdopodobieństwo wykrycia HSV jest znacznie zmniejszone. Zastosowanie agresywnych środków do dezynfekcji uszkodzeń może inaktywować wirusa. Leczenie alginianem wapnia jest szkodliwe dla HSV i dlatego nie ma zastosowania..

Jest ważny

Bezpośrednie testy potwierdzają obecność HSV w podejrzanym ognisku lub w wydzielinach z narządów płciowych. W idealnym przypadku analizuje się próbkę z pęcherzyka, który pojawił się mniej niż 24 godziny temu..

Jeśli istnieje wiele baniek, aspiruj zawartość kilku. Według badań czułość analizy jest mniejsza u pacjentów z nawracającymi zmianami chorobowymi niż u pacjentów z pierwszymi epizodami.

W niektórych przypadkach mikroskopia elektronowa płynnego biomateriału może dać wynik pozytywny. Ta procedura, choć szybka, jest stosunkowo niewrażliwa, a pozytywne wyniki pojawiają się tylko w przypadku zewnętrznych zmian (wysypka na pośladkach lub udach, rzadziej na błony śluzowe). Korzystne jest pobranie płynu analitycznego z całego pęcherzyka za pomocą strzykawki tuberkulinowej, podczas gdy aspiracja zawartości jest wystarczająca..

Kroplę suszy się powietrzem i bada pod mikroskopem..

Niektóre laboratoria stosują metody molekularne do wykrywania i typowania HSV. Próbki pobrane do izolacji lub wykrywania antygenu są również odpowiednie dla metod wykrywania DNA. Zwiększona czułość diagnostyki PCR w oparciu o amplifikację kwasów nukleinowych, w porównaniu z innymi metodami bezpośrednimi (wykrywanie kultury lub antygenu), pozwala na analizę materiału przy minimalnej liczbie patogennych cząstek.

Standardowa kultura wirusowa

Wysianie na podłożu odżywczym - złoty standard wykrywania HSV specyficzności 100% w odniesieniu do HSV-1 i HSV-2, wrażliwość zależy od stopnia zakażenia HSV, a czas przygotowania próbki.

Czułość waha się od 75% dla pierwszych epizodów do 50% dla rzutów..

RIF w opryszczce

Wykrywanie antygenu HSV przez barwienie rozmazami DFA (fluorescencja) może zapewnić szybkie określenie hodowli komórkowej. Ważne jest, aby dla tej analizy uzyskać próbkę o wysokiej jakości; w tym trybie czułość testu może osiągnąć 90%, szczególnie podczas początkowej infekcji.

Materiał jest barwiony specjalną substancją fluorescencyjną, a następnie mikroskopią.

Wykrywanie antygenu wirusowego jest alternatywą dla metody diagnostyki kulturowej, metoda, która może pomóc w przypadku, gdy w przypadku niewłaściwego przetwarzania i transportu próbek każdy obecny wirus może zostać unieczynniony. 

W celu potwierdzenia HSV czułość testu jest podobna lub wyższa niż w metodach hodowli..

Wykrywanie antygenów HSV jest możliwe przy użyciu testów DFA lub testów immunoperoksydazy na próbkach komórek utrwalonych i poddanych obróbce.. 

Smuga dzank

Infekcja opryszczkowa powoduje typowe zmiany cytopatyczne w komórkach nabłonka narządów płciowych). Zwiększają one rozmiar, pojawiają się wtręty wewnątrzjądrowe, a komórki wielojądrzaste są często wizualizowane. Po specjalnym zabarwieniu, próbki są badane przy użyciu mikroskopu świetlnego..

Wady: ta metoda ma niską czułość i nie rozróżnia HSV-1 i HSV-2. Ponadto podobnym obrazem może być na przykład ospa wietrzna.

Aby potwierdzić diagnozę, potrzebne są bardziej czułe testy..

Mikroskopia elektronowa

Kierowania płynu badania pęcherzyków lub innych materiałów klinicznych metodą mikroskopii elektronowej w diagnostyce HSV ograniczona przez fakt, że morfologia wirusem i nie pozwala na odróżnienie od innych wirusów HSV opryszczki (na przykład wirusa ospy wietrznej i półpaśca). Ta tradycyjna metoda została w dużej mierze zastąpiona fluorescencyjnym rozmazem wymazu, który dostarczył specyficznego rodzaju różnicowania HSV-1 i HSV-2.

Wykrywanie wirusa DNA

Wirusowe DNA można wykryć metodami hybrydyzacji za pomocą próbek znakowanych radioaktywnie lub biotynylowanych. Metody te zostały w dużej mierze zastąpione przez bardziej czułe i mniej czasochłonne badania wykorzystujące amplifikację docelowego DNA HSV przy użyciu reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR). Specyficzność metody amplifikacji zapewnia albo powtarzalna diagnostyka PCR z docelowymi swoistymi starterami, albo przy użyciu specyficznej dla HSV hybrydyzacji ze zamplifikowanymi produktami..

W przypadku możliwej opryszczki narządów płciowych, PCR wykrywa wirusowy DNA w ciągu kilku dni po tym, jak zmiana nie zawiera demonstracyjnego zakaźnego wirusa. Oznacza to, że metoda diagnostyczna oparta na amplifikacji kwasu nukleinowego może dawać wynik pozytywny nawet wtedy, gdy wystąpił objawowy powrót do zdrowia i leczenie nie jest już konieczne..

Wyniki negatywnego wysiewu są zwykle potwierdzane przez diagnostykę PCR. Czułość PCR jest wyższa niż standardowa kultura. Pojawienie się PCR w czasie rzeczywistym zminimalizowało ryzyko fałszywie dodatnich wyników.. 

Pośrednie analizy serologiczne

Około 8-10 ml krwi zbiera się w probówce bez antykoagulantów lub konserwantów. Po koagulacji w temperaturze pokojowej surowicę odwirowuje się i umieszcza w innej probówce. Jeśli przechowywanie jest konieczne przez kilka tygodni, surowicę chłodzi się w temperaturze 4 ° C lub zamraża w temperaturze poniżej -20 ° C. Nie zaleca się zamrażania krwi pełnej w wyniku hemolizy, co sprawia, że ​​próbka nie nadaje się do testów serologicznych..

Analiza wykrywająca przeciwciała przeciwko HSV jest zalecana, gdy nie można przeprowadzić innych badań wirusologicznych lub dać wyniki negatywne). Jest to szczególnie prawdziwe w przypadku bezobjawowej infekcji..  

Testy serologiczne na HSV można zastosować w następujących przypadkach:

  • badanie przenoszenia zakażenia wirusem opryszczki u partnera;
  • pierwszy epizod infekcji, szczególnie u kobiet w ciąży;
  • nawracające HSV;
  • ankieta z pogrupowanymi parami,
  • planowanie ciąży (mężczyzna jest pozytywny, kobieta jest ujemna);
  • Ciężka historia położnicza i ginekologiczna z podejrzeniem zakażenia wirusem opryszczki;
  • badanie przesiewowe w kierunku STI;
  • badania przesiewowe u pacjentów zakażonych wirusem HIV w celu wykrycia HSV-2.

Chociaż wiele testów serologicznych wykrywa przeciwciała przeciwko HSV, nie jest możliwe ustalenie określonego typu (1 lub 2).

Istnieje ścisłe powiązanie serologiczne między HSV-1 i HSV-2, z których każdy koduje serologicznie odmienną glikoproteinę G (gG-1 i gG-2). Różnica ta została wykorzystana w rozwoju testów serologicznych specyficznych dla określonego typu.. 

ELISA, immunoblotting

Immunoblotting (WB) jest standardem do wykrywania przeciwciał przeciwko HSV. Testy mają wysoką czułość i zdolność odróżniania przeciwciał od HSV-1 i HSV-2. Reakcja zachodzi wraz z uwolnieniem utrwalonych macierzy białkowych ("blotków") z lizatów komórek HSV-1 lub HSV-2.

Największą wartością diagnostyczną jest definicja przeciwciał IgM, które pojawiają się około 2 tygodnie po zakażeniu lub są obecne we krwi podczas przewlekłego zakażenia lub jego aktywacji.

IgG jest determinowane przez długotrwałe występowanie infekcji w organizmie lub kiedy jest aktywowane.

Jest ważny

Metoda ELISA może być ilościowa (oznaczanie miana przeciwciał, im wyższy, tym ostrzejszy proces) i jakościowy (obecność wirusa, typ, przeciwciała, poprzednie nawroty).

Wykrywanie przeciwciał przeciwko białkom predanimnyh wirusa pomaga ocenić czas trwania procesu.

Rozszyfrowanie analizy testu ELISA na opryszczkę:

  • IgM "-", IgG na "+" białka przedawkowe, IgG późne "+" / pierwotne ostre zakażenie lub jego nawroty.
  • IgM "-", IgG przedwczesne białka "-", IgG późne "+" / mają odpowiedź immunologiczną na wirusa opryszczki (nosiciel).
  • IgM "+", IgG do "+" białek przedarodkowych, późne IgG "-" / pierwotne ostre zakażenie.
  • IgM "+", IgG do "+" białek predawn, późne "+" IgG / pierwotna ostra infekcja.
  • IgM "-", IgG na przedwczesne białka "-", IgG późno "-" / norma, wskazując na brak procesu patologicznego.

Testowanie oporności

Istnieje wiele leków przeciwwirusowych do leczenia zakażeń HSV; większość z nich to acyklowir. Oporność HSV na acyklowir wzrasta, a prawie wszystkie klinicznie znaczące szczepy oporne na acyklowir są diagnozowane u pacjentów z obniżoną odpornością, szczególnie tych, którzy są zakażeni wirusem HIV. Rozwój oporności zwykle występuje w wyniku mutacji w genomie wirusowym, a obecność selektywnego działania leku prowadzi do stabilnej populacji wirusów. Izolacja HSV z utrzymujących się zmian, pomimo odpowiednich dawek, jest podejrzana o oporność na Acyclovir.

Jakie choroby są stosowane do diagnostyki różnicowej opryszczki?

Diagnostyka różnicowa jest wykonywana z następującymi patologiami:

  • Zespół Bechtecha (niezakaźne zapalenie naczyń, charakteryzujące się orogenitalnymi aftalnymi owrzodzeniami, uszkodzeniem skóry i oczu oraz zaangażowaniem CNS, przewodu pokarmowego i stawów);
  • kandydoza;
  • miękki chancre;
  • Wirus Coxsackie;
  • półpasiec;
  • kiła;
  • Choroba Crohna;
  • niektóre dermatozy;
  • ziarniniak pachwinowy itp..

Mishina Victoria, urolog, recenzent medyczny